家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．（1）进行转基因操作前，需用酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．

Question

家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
（1）进行转基因操作前，需用______酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的______和______之间．
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞．改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、______和______．
（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以______增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．

Answer 1

（1）为了使组织分散开为单个细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶．
（2）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因．启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端．
（3）PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和一对DNA引物；在PCR反应过程中，有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右，其作用让引物结合到互补DNA链上，形成局部双链．
（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
故答案为：
（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） 
（2）启动子 终止子 
（3）TaqDNA聚合酶   对干扰素基因特异性的DNA引物对  
（4）增大细胞贴壁生长的附着面积