2008年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，使橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失．（1）某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用组织培养技术大

Question

2008年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，使橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失．
（1）某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用组织培养技术大量繁殖，该技术应先将离体的柑橘组织或细胞培养一段时间，使其通过______分裂方式形成愈伤组织，此过程称之为______，然后继续培养，又可以重新长成根或芽等器官，这一过程称之为______．
（2）组织培养的选材非常关键，植物材料的选择直接关系到实验的成败．若用花药进行离体培养，则应选择花粉发育至______期的花药培养成功率最高．选择花粉时，一般要通过______来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是______．产生花粉植株一般有两种途径；一种是花粉通过______阶段发育为植株；另一种是花粉在______培养基上先形成愈伤组织，再分化成植株．这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中______．
（3）影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有______和______．
（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌？
①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾，⑤实验操作者的双手，⑥三角锥形瓶．
______（填编号）需要灭菌，______（填编号）需要消毒．

Answer 1

（1）植物组织培养中细胞发生的是有丝分裂，细胞经脱分化形成愈伤组织，经再分化形成完整个体．
（2）单核期花粉对离体刺激敏感，选用该期花粉可提高培养的成功率，选择花粉时可用显微镜观察、筛选；对花粉细胞核染色应该选择碱性染料，常用醋酸洋红．产生花粉植株一般有两种途径；一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再分化成植株．细胞培养成植株的两条途径取决于植物激素的种类及比例，尤其是生长素和细胞分裂素．
（3）影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有生长素和细胞分裂素．在培养基中生长素与细胞分裂素的用量比值不同，诱导生根发芽结果不同，当比值低时，有利于发芽，比值高时，有利于生根．
（4）灭菌对象为培养基和实验器材，消毒对象为要保持活性的材料和实验者自身．
故答案为：
（1）有丝        脱分化       再分化
（2）单核        镜检（显微镜观察）       醋酸洋红       胚状体       诱导      激素的种类及其浓度配比
（3）生长素      细胞分裂素
（4）①②③⑥④⑤