家蝇幼虫体内有一种抗肿瘤蛋白，科学家发现此蛋白质具有抗癌的奇特疗效，它能对肿瘤产生特异性的抑制，并能增强机体的细胞免疫和非特异性免疫．英国皇家医学会已经将此蛋白质列为2

Question

家蝇幼虫体内有一种抗肿瘤蛋白，科学家发现此蛋白质具有抗癌的奇特疗效，它能对肿瘤产生特异性的抑制，并能增强机体的细胞免疫和非特异性免疫．英国皇家医学会已经将此蛋白质列为21世纪首选抗癌药物．如图所示为通过基因工程技术生产这种蛋白质的方法，请回答下列问题：

（1）结构A的名称为______，其作用是将目的基因导入受体细胞，使其在受体细胞中复制并______．
（2）在进行导入过程时，通常用______处理大肠杆菌细胞，使其处于______，然后再将B溶于缓冲液中与______混合．
（3）经检测抗肿瘤基因已经成功导入受体细胞，但并未检测出抗肿瘤蛋白mRNA，其原因最可能是基因表达载体上目的基因首端未加入______．经修改后，为检测是否翻译出抗肿瘤蛋白，需从大肠杆菌中提取蛋白质，用______进行分子杂交，若有______出现，表明目的基因已经成功表达．
（4）也可以通过构建乳腺生物反应器的方法来生产抗肿瘤蛋白，其大致过程为将目的基因与适合的载体重组，通过______导入哺乳动物的______中，体外培养至早期胚胎，经过______的技术送入母体内，使其生长发育成转基因动物，最后从该动物的______中提取抗肿瘤蛋白．

Answer 1

（1）图中A为质粒，是基因工程常用的运载体，其作用是将目的基因导入受体细胞，使其在受体细胞中复制并表达．
（2）将目的基因导入微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即用Ca²⁺处理大肠杆菌细胞，使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态．
（3）经检测抗肿瘤基因已经成功导入受体细胞，但并未检测出抗肿瘤蛋白mRNA，说明目的基因并没有表达，其原因最可能是基因表达载体上目的基因首端未加入启动子．检测目的基因是否翻译出抗肿瘤蛋白，常采用抗体-抗原杂交法，即需从大肠杆菌中提取蛋白质，用相应的抗体进行分子杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已经成功表达．
（4）也可以通过构建乳腺生物反应器的方法来生产抗肿瘤蛋白，其大致过程为将目的基因与适合的载体重组，通过显微注射导入哺乳动物的受精卵中，体外培养至早期胚胎，经过胚胎移植送入母体内，使其生长发育成转基因动物，最后从该动物的乳汁中提取抗肿瘤蛋白．
故答案为：
（1）质粒  表达    
（2）Ca²⁺   感受态   受体细胞
（3）启动子   相应的抗体   杂交带    
（4）显微注射   受精卵   胚胎移植   乳汁