咽拭子的微生物检验步骤,以及所需的培养基的种类是什么?

Question

咽拭子的微生物检验步骤,以及所需的培养基的种类是什么?

Answer 1

1、营养琼脂（普通琼脂)
成份：牛肉浸液（或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升
琼脂（视天气,琼脂质量而定)
制法：将上物加热溶解,补足水,调ph至7．6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟.
用途：作普通琼脂平皿.
2、血琼脂平板（BA)
制法：取营养琼脂（PH7．6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用.
用途：1． 一般棉拭子均接种此培养基.
2．尿液,脓液
3．分离细菌标本用.
3、基础培养基 （肉膏汤BB)
成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克
氯化钠 5克 水 1000毫升
制法：将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7．6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用.
用途：1 作耐药试验,增菌用分装小管.
2 作普通琼脂斜面.
4、血液培养基（大管肉汤培养基)
成份：1 新鲜牛肉浸液 1000毫升
2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升
3 MgSO4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升
4 枸椽酸钠 0．3g
制法：1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌.
2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用.
用途：作血,骨髓培养用.
5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂)
成份： 蛋白胨 10克 乳糖 10克
氯化钠 5克 琼脂 25（22)克
水 1000毫升 2%伊红溶液20毫升
0．5%美兰溶液 20毫升
制法：将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7．4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0．5%美兰溶液20毫升,（115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用.（高压以后方可再加乳糖)
用途：用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查.
1
6、罗文斯坦培养基
成份：磷酸二氢钾 2．4克 硫酸镁 0．24克
枸椽酸钠 0．6克 天门冬素 3．6克
纯甘油（丙三醇) 12毫升 水 600毫升
马铃薯粉 30克 鸡蛋 1000毫升（约3公斤)
2%孔雀绿水溶液 20毫升
制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿).可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌.
2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散.
3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升.
4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时（或放85℃烤箱内连续二次).
质控标准： 1 灭菌试验合格.
2 接种结核杆菌要求两星期生长良好.
用途：作结核分枝杆菌培养用.
7、结核半固体培养基
成份：磷酸氢二钠 19克 硫酸镁 0．6克
磷酸二氢钾 2．5克 天门冬素 5克
1%孔雀绿 1．5克 甘油 20毫升
吐温80（10%) 5毫升 水 1000毫升
枸椽酸钠 2．5克 动物血清 100毫升
琼脂 1．5克（80小时用甲醇去脂)
1%孔雀绿 0．78毫升 吐温80（10%) 5毫升
加动物血清 100毫升
制法： 1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7.2
2 分管（每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌.
3 待冷后无菌法加无菌血清（绵羊血或兔血)每管约1毫升备用.
4 去除琼脂方法：取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用.
质控标准：1无菌实验合格.www.med126.com
2琼脂硬度合适而清亮.
3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用.
用途：培养结核杆菌用.
8、亚碲酸钾血琼脂平板
成份：琼脂基础 100毫升 1 0%葡萄糖 2毫升
1%亚碲酸钾 4．5毫升 绵羊血 10毫升
制法：1将琼脂基础溶解好,加入羊血.
2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4．5毫升混合后倒入无菌平板,凝固后存冰箱备用.
质控标准：接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长.
用途：供培养及鉴别白喉杆菌用.

9、米培养基
成份：白米 20克 水 1000毫升
琼脂 20克 吐温80 10毫升
制法：1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好.
2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升.
3加琼脂20克,吐温-80 10毫升煮溶,分装中型管（每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用.
质控标准：1灭菌.
2要求清亮.
3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子.
用途：培养白色念珠菌用.
10、蛋白胨水培养基
成份：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克
水加至 100毫升 PH调至 7．8
制法：把以上各物称好溶于水,调节PH7．6分装消毒备用.
质控标准：1 放置37℃无菌生长.
2 接种大肠杆菌24小时生长良好.
3 可作中国兰平板基础液.
可作靛基质基础液（作此试验需要色氨酸蛋白胨).
11、血培养基
成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克
氯化钠 5克 葡萄糖 3克
枸椽酸钠 3克 MgSO4.7H2O 20毫升
0．5%PABA 10毫升 酵母浸液 10毫升 0．2克（2%过滤)
*酚红0．4% 6毫升 水 1000毫升
琼脂 0．5克
*：作大BB,小BB时,不要加酚红和琼脂.
制法：1、除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7．4
2、调好PH后再加酚红.
3、硫酸镁、PABA另外无菌再加入（亚细,小BB)