在植物抗病毒基因工程中，利用植物病毒复制酶基因是一种常见的方法，某实验小组将芜菁花叶病毒复制酶（TuMV-Nib）反义基因导入大白菜中，经检测表明TuMV-Nib不仅整合到大白菜的染色体中

Question

在植物抗病毒基因工程中，利用植物病毒复制酶基因是一种常见的方法，某实验小组将芜菁花叶病毒复制酶（TuMV-Nib）反义基因导入大白菜中，经检测表明TuMV-Nib不仅整合到大白菜的染色体中，还获得表达，而且转基因植株的接种测试表明转基因植株具有明显的抗病性．TuMV-Nib反义基因的作用过程如图所示，请回答下列问题：

（1）实验室大量扩展TuMV-Nib反义基因常用的技术为___，该技术需要加入的原料是___，利用该技术扩增目的基因时___（填“需要”或“不需要”）知道该基因的全部碱基序列．
（2）将目的基因导入植物细胞的常用方法是___，该方法常将目的基因导入Ti质粒的T-DNA分子中，其原因是___．分析图示可知，TuMV-Nib反义基因主要通过影响图中的___（填序号）过程，影响TuMV-Nib基因的表达．
（3）对已经被病毒感染的植株，可选取该植株的茎尖通过___技术获得脱毒苗，利用茎尖作为材料的原因是___．

Answer 1

（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因；该技术需要加入的原料是四种脱氧核糖核苷酸（或dATP、dTTP、dCTP、dGTP）；利用该技术扩增目的基因时，只要有一段已知目的基因的核苷酸序以便于合成一对引物即可，不需要知道该基因的全部碱基序列．
（2）将目的基因导入植物细胞的常用农杆菌转化法．农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．分析图示可知，TuMV-Nib反义基因转录形成的反义mRNA可与mRNA形成杂交分子，影响TuMV-Nib基因表达的②翻译过程．
（3）对已经被病毒感染的植株，可选取该植株的茎尖通过植物组织培养技术获得脱毒苗，利用茎尖作为材料的原因是茎尖很少或不会被病毒感染．
故答案为：
（1）PCR    四种脱氧核糖核苷酸（或dATP、dTTP、dCTP、dGTP）   不需要
（2）农杆菌转化法     T-DNA能主动转移并整合到宿主细胞染色体的DNA分子中   ②
（3）植物组织培养     茎尖很少或不会被病毒感染