组织型纤溶酶原激活剂（tPA）在人体纤溶和凝血的平衡调节中发挥着关键性的作用，现欲利用基因工程技术将tPA基因导入奶牛成纤维细胞中，并通过核移植技术获得克隆转基因奶牛，最后从

Question

组织型纤溶酶原激活剂（tPA）在人体纤溶和凝血的平衡调节中发挥着关键性的作用，现欲利用基因工程技术将tPA基因导入奶牛成纤维细胞中，并通过核移植技术获得克隆转基因奶牛，最后从奶牛乳汁中获取组织型纤溶酶原激活剂．请回答：
（1）为获得大量tPA基因，可将其连接到___上，通过大肠杆菌培养扩增．构建重组DNA分子时，需要用到的工具酶有___，为了便于检测目的基因是否成功导入受体成纤维细胞中，重组DNA分子上要有___．
（2）核移植时，需将成纤维细胞的细胞核移人去核卵细胞中获得重组细胞，部分原因是卵细胞的细胞质具有调控___发育的作用．通过___技术，将重组细胞培养成早期囊胚．将早期囊胚移植到代孕受体之前需要经过___处理，以便成功植人或着床．
（3）为了繁殖更多后代，可以通过胚胎分割技术，产生同卵多仔．下列关于该技术的叙述，错误的是___．
A．增加胚胎数量，快速繁殖 B．可以采用相关酶处理卵裂球
C．该技术涉及显微操作技术 D．同卵多仔的表现型一定相同．

Answer 1

（1）为获得大量tPA基因，可将其连接到质粒上，通过大肠杆菌培养扩增．构建基因表达载体时，首先需要限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子，其次要求DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA；为了便于检测目的基因是否成功导入受体成纤维细胞中，重组DNA分子上要有标记基因．
（2）核移植时，需将成纤维细胞的细胞核移人去核卵细胞中获得重组细胞，部分原因是卵细胞的细胞质具有调控细胞核发育的作用．通过早期胚胎培养技术，将重组细胞培养成早期囊胚．胚胎移植前，需要经过同期发情处理，使供受体的生理状态相同，以便成功植人或着床．
（3）A．胚胎分割技术能增加胚胎数量，快速繁殖，A正确；
B．不同阶段的胚胎进行胚胎分割时，可采用的方法有一定的差别，若胚胎处于卵裂期可以采用酶解法或机械法，若囊胚则只能运用机械法分割，且要求等份分割，B正确；
C、胚胎分割技术涉及显微操作技，C正确；
D．生物的性状由基因型与环境共同决定，因此同卵多仔的基因型相同，但表现型一定相同，D错误．
故选：D．
故答案为：
（1）质粒       限制酶和DNA连接酶     标记基因 
（2）细胞核      早期胚胎培养      同期发情 
（3）D