在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．如图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答下面的问

Question

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan^r）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．如图为获得抗虫棉的技术流程．

请据图回答下面的问题．
（1）A过程需要的酶有______、______
（2）质粒多存在于细菌中，它是能自我复制的______
（3）B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件是：______，______．
（4）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入______
（5）为确定抗虫棉是否培育成功，要在个体水平上鉴定，后者的具体过程是______．

Answer 1

（1）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（2）质粒是小型环状DNA分子．
（3）B过程是培养并选择含有重组质粒的土壤农杆菌，其中“选择”要求质粒作为运载体必须具有标记基因；“培养”要求质粒作为运载体必须能在宿主细胞中复制并稳定保存．
（4）标记基因是卡那霉素抗性基因，因此B过程所用的培养基中应加入卡那霉素．
（5）为确定抗虫棉是否培育成功，可从个体水平上进行鉴定，即让棉铃虫采食棉花叶片观察存活情况．
故答案为：
（1）限制酶    DNA连接酶     
（2）小型环状DNA
（3）具有标记基因     能在宿主细胞中复制并稳定保存
（4）卡那霉素
（5）让棉铃虫采食棉花叶片观察存活情况