药物A能促进干细胞增殖，且浓度越大促进作用越强．活细胞中的某种物质能将MTT还原成蓝紫色结晶并沉淀在细胞中，死细胞无此功能；可通过仪器检测到蓝紫色物质的光吸收值，活细胞数与

Question

药物A能促进干细胞增殖，且浓度越大促进作用越强．活细胞中的某种物质能将MTT还原成蓝紫色结晶并沉淀在细胞中，死细胞无此功能；可通过仪器检测到蓝紫色物质的光吸收值，活细胞数与光吸收值成正相关．请设计实验验证药物A的作用．
实验材料：小鼠胚胎干细胞悬液（含小鼠胚胎干细胞和全部营养物质）、3.0mg/ml药物
A、适宜浓度的MTT溶液、培养瓶等所需材料和用具．
（要求与说明：不考虑MTT溶液对细胞生存的影响，通过仪器检测蓝紫色物质光吸收值的具体过程不作要求）
（1）实验思路：
①用生理盐水配制浓度为1.5mg/ml药物A；
②取三组培养瓶，分别加入等量的小鼠胚胎干细胞悬液，编号甲、乙、丙，___；
③用移液管分别吸取适量且等量培养瓶中的液体置于试管中，分别加入___，摇匀，测定各组的光吸收值，再制片在显微镜下进行活细胞计数，并记录；
④置于相同且适宜的条件下培养一段时间；
⑤___，对测得的数据进行统计分析．
（2）请以柱形图表示预期的实验结果．
___
（3）该实验的目的是___．

Answer 1

（1）②实验设置应遵循对照原则，所以取三组培养瓶，分别加入等量的小鼠胚胎干细胞悬液，编号甲、乙、丙，乙、丙分别加入适量且等量的浓度为1.5mg/ml、3mg/ml药物A，甲加入等量的生理盐水，和前2组进行对照．
③活细胞中的某种物质能将MTT还原成蓝紫色结晶并沉淀在细胞中，死细胞无此功能；可通过仪器检测到蓝紫色物质的光吸收值，活细胞数与光吸收值成正相关．因此，用移液管分别吸取适量且等量培养瓶中的液体置于试管中，分别加入适量适宜浓度的MTT溶液，摇匀，测定各组的光吸收值，再制片在显微镜下进行活细胞计数，并记录．
⑤为了避免实验的误差，和减少实验误差，所以重复步骤③，多测几次数据，求平均值．
（2）由于活细胞数与光吸收值成正相关，可预测实验结果如图：
（3）药物A能促进干细胞增殖，且浓度越大促进作用越强，本实验自变量为两种浓度药物A，因变量为干细胞数目，因此本实验的目的是验证不同浓度药物A对干细胞增殖的影响．
故答案为：
（1）②乙、丙分别加入适量且等量的浓度为1.5mg/ml、3mg/ml药物A，甲加入等量的生理盐水
③适量适宜浓度的MTT溶液          
⑤重复步骤③
（3）
（3）验证不同浓度药物A对干细胞增殖的影响