利用微生物转化胆固醇在医药生产上有重要作用．实验人员从土壤中筛选胆固醇转化菌株的过程如图．请分析回答下列问题：（1）实验人员将土壤样品接种到富集培养液①中培养时，需要将

Question

利用微生物转化胆固醇在医药生产上有重要作用．实验人员从土壤中筛选胆固醇转化菌株的过程如图．请分析回答下列问题：

（1）实验人员将土壤样品接种到富集培养液①中培养时，需要将其置于摇床上不断振荡，其主要的作用有___
（2）培养一段时间后，从①中取适量培养液转移接种到选择培养液②中培养36h后，再转移到相同的选择培养液③中培养．与培养液①不同，培养液②③成份的主要特点是___．在相同的培养液②③中转移培养主要是为了避免原培养液中的干扰，同时，又可以___
（3）从③中取适量的培养液涂布到④之前，需要，涂布前需将涂布器___
（4）根据⑤中菌落的形态特征，选取所需的菌种接种到培养基⑥中临时___保藏．
（5）为进一步鉴定菌种，需从菌株中提取少量的DNA分子通过___（填技术）扩增并检测．

Answer 1

（1）分解胆固醇的微生物属于需氧型微生物，所以将土壤样品接种到富集培养液①中培养时，需要将其置于摇床上不断振荡以增加溶解氧．
（2）据图分析，培养液②③的作用是选择培养，筛选胆固醇转化菌株需要使用以胆固醇为唯一碳源的选择培养基．在相同的培养液②③中转移培养主要是为了避免原培养液中碳源的干扰，又可以筛选纯化获得可转化胆固醇的菌种．
（3）选择培养后的培养液需要进行梯度稀释才能进行涂布培养，涂布前需将涂布器在酒精灯火焰旁进行灼烧灭菌并冷却．
（4）筛选出目的菌株后，将菌种接种到培养基⑥中临时斜面保藏．
（5）为进一步鉴定菌种，需从菌株中提取少量的DNA分子通过PCR扩增并检测．
故答案为：
（1）增加溶解氧
（2）以胆固醇为唯一碳源   碳源   筛选纯化获得可转化胆固醇的菌种
（3）梯度稀释   灼烧并冷却
（4）斜面
（5）PCR