（2014•普陀区一模）富集培养是从微生物混合群开始，对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法．从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯

Question

（2014•普陀区一模）富集培养是从微生物混合群开始，对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法．从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯（环境污染物）降解的关键酶，如图所示用富集方法从土壤中分离联苯降解菌的过程．请分析回答：

（1）①②③过程目的是______．
（2）进行⑤过程的目的是______，可采用______法将初筛菌液接种在固体培养基上．在⑤过程中，首先要对培养基和培养皿要进行高压蒸汽灭菌，目的是______．
（3）在⑥和⑦的实验检测过程中，作为对照组的是______组，设置实验组的目是______．
（4）若用此方法从土壤中分离自生固氮菌，菌落在平板上培养时间不宜过长的原因是______．配置的培养基中所需的营养物质有______（多选）
A、碳源       B、氮源     C、生长因子      D、水分      E、无机盐
（5）某同学在做微生物实验时，不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起，请你写出分离得到纯度较高的自生固氮菌和酵母菌的实验原理______．

Answer 1

（1）①②③过程目的是通过富集培养，增大联苯降解菌（目的菌）的浓度（比例）．
（2）进行⑤过程的目的是获得联苯降解菌的单个菌落（进一步分离纯化目的菌），可采用稀释涂布法法将初筛菌液接种在固体培养基上．在⑤过程中，首先要对培养基和培养皿要进行高压蒸汽灭菌，目的是杀灭细菌和芽孢，防止杂菌干扰实验结果．
（3）在⑥和⑦的实验检测过程中，⑦作为实验的对照组，实验组⑥能够说明获得的单菌落中没有其它杂菌．
（4）由于自生固氮菌会分泌含氮化合物，引起杂菌生长，因此用此方法从土壤中分离自生固氮菌，菌落在平板上培养时间不宜过长．由于自身固氮菌能够固定空气的氮元素，因此在培养基中不加氮源可以起到选择作用，但是碳源、生长因子、水分和无机盐等仍然是必须的成分．
（5）自生固氮菌能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能，因此可以用无氮培养基筛选出自身固氮菌；而青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖，因此在含有青霉素的培养基中可以筛选出酵母菌．
故答案为：
（1）通过富集培养，增大联苯降解菌（目的菌）的浓度（比例）
（2）获得联苯降解菌的单个菌落（进一步分离纯化目的菌）   稀释涂布法  杀灭细菌和芽孢，防止杂菌干扰实验结果
（3）⑦说明获得的单菌落中没有其它杂菌
（4）自生固氮菌会分泌含氮化合物，引起杂菌生长           ACDE
（5）自生固氮菌能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖