已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶．脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于染色．微生物A产生的油脂

Question

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶．脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于___染色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用___（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以___为碳源的固体培养基进行培养，此外培养基中的营养成分还应该含有水、氮源和___．
（3）若要测定培养液中微生物B的活菌数量，可选用___法进行计数，统计的数目往往比活菌的实际数目偏___．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，___℃条件下该酶活力最小．为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕___℃设计后续实验．

Answer 1

（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）染成橘黄色（红色）故显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色．因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取．
（2）筛选产脂肪酶的微生物B时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，培养基中应该添加脂肪作为唯一碳源．此外培养基中的营养成分还应该含有水、氮源和无机盐．
（3）测定微生物的数量，可以在显微镜下用稀释涂布平板法进行计数．由于在培养的过程中可能有少数个体死亡，不能繁殖为菌落，因此统计的数目往往比活菌的实际数目偏低．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小，该酶的最适温度为40℃左右，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验．
故答案为：
（1）苏丹Ⅲ染液或者苏丹Ⅵ染液    萃取法
（2）脂肪   无机盐  
（3）稀释涂布平板法   低
（4）45   40