骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一．科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向．实验过程如下：步骤1用含青霉素和链霉素的高糖培

Question

骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一．科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向．实验过程如下：
步骤1用含青霉素和链霉素的高糖培养基，在37℃、5%CO₂培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间．
步骤2取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞，用加入不同浓度的TSA（0～200ng•mL^-1）的培养基继续培养24h．
步骤3对各组细胞进行抽样检测，检测方法是先用台盼蓝试剂（一种细胞活性染料）染色再用血细胞计数板计数，统计细胞存活率（未染色细胞数/细胞总数×100%），结果如图1．
步骤4分别提取TSA浓度为0ng•mL^-1、25ng•mL^-1、50ng•mL^-1处理的3组细胞，测量细胞中与凋亡相关的基因（Bax、Bcl-2）和β-肌动蛋白基因（不同的组织细胞中表达相对恒定）表达的蛋白质量并计算比值，结果如图2．

分析回答：
（1）骨肉瘤细胞的恶性增殖和转移与细胞膜上___（成分）种类和数量的改变有关．高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是___，细胞培养箱中保持5% CO₂的作用是___．
（2）步骤2中，设置0ng•mL^-1 TSA实验的主要目的是___．
（3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是___．
（4）图1所示结果表明___．
（5）根据图2判断，骨肉瘤细胞中___基因过度表达会加速细胞凋亡．

Answer 1

（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是骨肉瘤细胞膜上的糖蛋白等物质减少．高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是防止杂菌污染，细胞培养箱中保持5% CO₂的作用是维持培养液pH．
（2）生物学实验中通常要调置对照实验，其中空白对照实验的作用是排除非测量因素（实验自变量以外的影响实验结果的因素）对实验结果的影响．
（3）根据细胞存活率=末染色细胞数/细胞总数，可以活细胞不能被染色，即由于细胞膜具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞，因此，台盼蓝是一种活性染色剂．
（4）根据图1显示实验结果是随着处理的TSA浓度增加骨肉瘤细胞的存活率下降，说明TSA浓度增加对骨肉瘤细胞凋亡的促进作用增强，注意实验结果说明（结论）不等于实验结果．
（5）图2实验结果显示，TSA浓度越高Bcl-2表达蛋白质越少，而Bax表达蛋白质越多，说明前者蛋白质是抑制细胞凋亡而后者旺盛表达促进细胞凋亡．
故答案为：
（1）糖蛋白  防止杂菌污染   维持培养液pH
（2）排除非测试因素对实验结果的影响
（3）活细胞的细胞膜具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞内（死细胞膜失去选择透过性，台盼蓝能进入死细胞内）
（4）TSA浓度越高对骨肉瘤细胞凋亡的促进作用越强  
（5）Bax