多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损．番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜．利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学

Question

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损．番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜．利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄．请据图回答：
（1）提取目的基因
①若已获取PG的mRNA，可通______获取PG基因．
②在该基因上游加结构A可确保基因的转录，结构A上应具有______结合位点．得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端．已知BamHI的识别序列如上图甲所示，请在图乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端．
③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是______．
（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有______的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入______．培养24～48h后取样，在质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液中，观察细胞______现象来鉴别细胞壁是否再生．
（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与______互补结合，抑制PG基因的正常表达．判断转基因番茄培育成功的方法是______．
（4）在该番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做______．获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用______方法使子代保持转基因的优良性状．
（5）改造过程需要的工具酶有______，______，如果在此过程中形成的是平末端，则其“缝合”作用的酶是______
（6）如图为在恒温、密闭的透明玻璃箱中模拟大棚栽种该番茄新品种的相关实验数据，其中甲图为一天中光照强度变化的曲线，乙图为CO₂浓度为300μL•L^-1时光照强度对光合作用影响的曲线．据图回答下列问题：
①14点与10点相比，叶绿体合成有机物速率较快的是______点，原因是______．
②若通过缓冲液维持密闭容器中CO₂浓度恒定为300μL•L^-1，9点C₅的合成速率______（填“小于”、“等于”或“大于”）10点C₅的合成速率，______点开始积累有机物，12～14点限制光合作用速率的主要因素是______．
③若向密闭容器中加入¹⁸O标记的O₂，请问在番茄的淀粉中能否检测到放射性的存在？______．若能，请写出¹⁸O的物质大致转移途径；若不能，请说明理由．______．








₂^-1

₂^-1₅₅
¹⁸₂¹⁸

Answer 1

（1）①已获取PG的mRNA，可通过逆转录或cDNA文库的方法获得目的基因．   ②因转录的产物是mRNA，在转录时需要RNA聚合酶．目的基因两侧的黏性末端如图：   ③重组质粒转化到大肠杆菌中的目...